特種蠟

新聞分類

產品分類

聯系我們

中石化南陽能源化工有限公司

銷 售 中 心:0377-61154008

銷售史經理:18637776596(QQ微信同號)

                         13837758567


商 務 郵 箱:[email protected] 

公 司 網 址:www.gzuqoa.live         

聯 系 地 址:河南南陽油田中南路北段


詳解制作防護蠟切片步驟

您的當前位置: 首 頁 >> 新聞中心 >> 公司新聞

詳解制作防護蠟切片步驟

發布日期:2019-05-06 00:00 來源:http://www.gzuqoa.live 點擊:

防護蠟切片組織學常規制片技術中最為廣泛應用的方法。防護蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用于其他許多學科領域的研究中。防護蠟切片詳細操作步驟:

1、取材

2、固定

3、脫水:30%--50%---70%(每步60分鐘)---85%---95%--100%---100%(每步30分鐘)。

4、透明:轉入1/2二甲苯+1/2無水酒精混合液20ml透明1h,純二甲苯20ml透明1h,再用純二甲苯20ml透明40min,并回收各液。

5、浸蠟:(1)將材料分別放入25%、50%、75%的防護蠟-二甲苯溶液中,每級30分鐘。該過程在高于防護蠟熔點3℃的溫箱中進行;(2)將材料放入溶解的純蠟中,時間為30分鐘,該過程再重復兩次。在高于防護蠟熔點3℃的溫箱中進行。

防護蠟

6、包埋(1)將溶解好的防護蠟在加入預先折好的紙船中,防護蠟溶解后應過濾后使用,以免含雜質影響切片;(2)材料放入紙船,并擺好在蠟中的位置,如果包埋的組織塊較多,應進行編號;(3)將紙船放置在冷水上加速冷卻過程。

7、切片(1)修整:用刀片修成方形或長方形蠟塊;(2)以少許熱蠟液,將蠟塊底部粘附于小木塊上,以少許防護蠟融化在蠟塊邊緣,加強粘附的強度;(3)木塊粘附于切片機上,調整切片機,使蠟塊切面與切片刀刃平行;(4)切成連續的蠟帶,切片刀的銳利度、蠟塊的硬度都會影響切片質量,可用熱水或冷水適當改變防護蠟的硬度,也可在冰箱中放置一段時間;(5)分割蠟帶,分開的蠟片放在45℃溫水上,使蠟片展開。

8、粘片與烤片(1)可用粘片劑防止蠟片滑脫,但粘附劑通常容易被染色而使切片背景有顏色,影響觀察,實驗表明,載玻片洗的足夠干凈,一般不會滑片;(2)用載玻片撈取展開后的蠟片,調整蠟片的位置使位于載玻片中央,自然干燥。

9、脫蠟與醇化(1)將切片放入純二甲苯溶液中10分鐘,使防護蠟完全溶解,共2次;(2)溶去防護蠟的切片依次放入75%、50%、25%二甲苯-乙醇溶液中,每級10分鐘;(3)再將切片依次放入100%、95%、90%、80%、70%、60%、50%的乙醇溶液中進行醇化,每級10分鐘。

10、染色(1)將切片放入番紅染液中30分鐘,番紅染色后,將切片依次放入50%、60%、70%、80%的乙醇溶液中分級洗脫,每級10分鐘;(2)洗脫后的切片放入固綠染液中染色1分鐘;

11、脫水、透明與封片(1)染色后的切片依次放入90%、90%、95%、100%乙醇溶液中分級洗脫,每級10分鐘;(2)洗脫后的切片依次放入25%、50%、75%、100%、100%二甲苯溶液中透明,每級10分鐘,出現渾濁表示脫水不徹底,需重來;(3)滴1-2滴中性樹膠,將潔凈的蓋玻片傾斜放下,封片,鏡檢,選擇好的貼上標簽,永久性切片制作完成。




相關標簽:微晶蠟

最近瀏覽:

在線客服
分享
排列三近300期走势图